在生命科學研究領(lǐng)域，細胞解離是眾多實驗的關(guān)鍵起始步驟，從原代細胞培養(yǎng)到組織工程研究，都離不開高效且溫和的細胞解離方法。Ⅳ 型膠原蛋白在多種組織中廣泛存在，尤其是基底膜。因此，針對富含 Ⅳ 型膠原蛋白組織的細胞解離，一款優(yōu)質(zhì)的 Ⅳ 型膠原蛋白酶至關(guān)重要。Worthington 的 Collagenase, Type 4 憑借優(yōu)異性能，有效解決了細胞解離過程中的諸多難點，成為科研人員的得力助手。作為Worthington公司的中國授權(quán)代理，上海起發(fā)強烈推薦其Collagenase, Type 4型膠原酶產(chǎn)品。

突破傳統(tǒng)細胞解離難點

攻克組織特異性消化難題

不同組織的細胞外基質(zhì)成分差異顯著，在富含 Ⅳ 型膠原蛋白的組織，如腎臟、肺臟等的基底膜以及一些腫瘤組織中，實現(xiàn)高效消化且不損傷細胞并非易事。傳統(tǒng)的酶解方法往往缺乏特異性，容易對細胞造成過度損傷，影響細胞的生物學特性。Worthington 的 Ⅳ 型膠原蛋白酶對 Ⅳ 型膠原蛋白具有高度特異性，能夠精準識別并切割 Ⅳ 型膠原蛋白的特定肽鍵。這一特性使得在處理富含 Ⅳ 型膠原蛋白的組織時，它能夠高效地分解細胞外基質(zhì)，將細胞從組織中解離出來，同時很大程度地保護細胞的完整性和活性。例如，在腎臟組織的解離實驗中，該酶能夠在溫和的條件下，快速且準確地切斷 Ⅳ 型膠原蛋白的連接，釋放出高活性的腎細胞，為腎臟疾病研究、藥物篩選等實驗提供了優(yōu)質(zhì)的細胞樣本。

消化效率與細胞損傷平衡的精妙把握

在細胞解離過程中，消化效率與細胞損傷之間的平衡是一個關(guān)鍵挑戰(zhàn)。消化時間過長或酶濃度過高，雖能提高消化效率，但會對細胞造成不可逆的損傷，影響細胞的后續(xù)功能；而消化時間過短或酶量不足，則無法實現(xiàn)細胞的有效分離。Worthington 的 Ⅳ 型膠原蛋白酶通過優(yōu)化的酶活性配方和作用機制，在保證高效消化的同時，顯著降低對細胞的損傷。其酶切動力學特性經(jīng)過精心設(shè)計，使得在較短的消化時間內(nèi)，就能實現(xiàn)細胞的充分解離。實驗表明，使用該酶進行細胞解離，細胞在解離后能夠迅速恢復正常的生理功能，存活率高，為后續(xù)的細胞培養(yǎng)、細胞生物學研究等提供了良好的基礎(chǔ)。

產(chǎn)品優(yōu)勢

• 低胰蛋白酶活性：保護細胞完整性

Collagenase, Type 4的核心優(yōu)勢在于其極低的胰蛋白酶活性。這種特性使其在細胞分離過程中能夠有效減少對細胞膜蛋白和受體的損傷，從而更好地保留細胞的完整性和功能。這對于胰島細胞分離等對細胞活性要求很高的實驗尤為重要。

• 高效的膠原降解能力

Collagenase, Type 4源自Clostridium histolyticum，是一種高效的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）和鋅肽酶。它能夠特異性地降解IV型和VII型膠原蛋白，這些是基底膜的主要成分。其高效的膠原降解能力使其在組織解離和細胞分離中表現(xiàn)出色，尤其是在處理胰島細胞、軟骨等組織時。

訂購信息

品名：4型膠原酶（Collagenase Type 4）

貨號：LS004188（1g規(guī)格）、LS004186（100mg規(guī)格）

產(chǎn)品形式：透析后的凍干粉末

儲存條件：2~8℃保存，避光防潮，密閉干燥

溶解與保存：Collagenase, Type 4為凍干粉，可在2-8℃下保存。溶解時需使用TESCA緩沖液（50 mM TES, 0.36 mM氯化鈣，pH 7.4），溶解后可分裝于-20℃凍存。

工作濃度：通常使用0.1-5 mg/mL的濃度進行組織消化，反應時間根據(jù)組織類型和實驗需求調(diào)整。

使用方法

（一）溶液配制

溶解：根據(jù)實驗需求，將Collagenase, Type 4溶解于無菌的緩沖液中（如Hanks平衡鹽溶液或PBS）。推薦濃度為1-2mg/ml。

過濾：使用0.22µm濾膜過濾，去除雜質(zhì)和可能的微生物污染。

儲存：配制好的溶液可在4°C下保存，建議在24小時內(nèi)使用。

（二）細胞分離步驟

組織處理：

將組織樣本清洗干凈，去除血跡和雜質(zhì)。

將組織切成小塊（約1-2mm3），放入含有Collagenase, Type4溶液的離心管中。

消化：

在37°C水浴或培養(yǎng)箱中進行消化，消化時間根據(jù)組織類型和細胞類型而定，通常為30分鐘至2小時。

消化過程中可輕輕搖晃離心管，以促進酶與組織的接觸。

終止消化：

消化完成后，加入適量的終止液（如含10%胎牛血清的培養(yǎng)基）終止反應。

通過離心（1000rpm，5分鐘）收集細胞。

細胞洗滌與培養(yǎng)：

用培養(yǎng)基洗滌細胞，去除殘留的酶。

將細胞懸液接種到培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，進行后續(xù)培養(yǎng)。

廣泛應用，助力科研

1. 胰島細胞分離

Collagenase, Type 4常用于胰島細胞的分離。由于其低胰蛋白酶活性，能夠有效減少對細胞膜蛋白和受體的損傷，從而更好地保留細胞的完整性和功能。

2. 腫瘤組織處理

該酶可用于消化富含膠原蛋白的腫瘤組織，如乳腺癌、結(jié)直腸癌和胰腺癌等。通過將腫瘤組織解離為單個細胞或小細胞團，可進行細胞計數(shù)、細胞周期分析、基因表達檢測等實驗，同時也有助于建立腫瘤細胞系。

3. 原代細胞分離

Collagenase, Type 4適用于多種原代細胞的分離，例如：

腎細胞：從腎臟組織中分離腎小管細胞或腎小球細胞，用于腎臟疾病模型研究。

軟骨細胞：從軟骨組織中分離軟骨細胞，用于軟骨修復或再生研究。

髓系細胞：用于制備髓系細胞，研究其在免疫系統(tǒng)中的功能。

4. 組織工程與再生醫(yī)學

在組織工程中，Collagenase, Type 4可用于處理天然組織，去除細胞成分后保留細胞外基質(zhì)作為支架材料。例如，在人工皮膚構(gòu)建中，該酶可去除皮膚細胞，保留細胞外基質(zhì)作為支架，用于種植皮膚細胞。

5. 細胞外基質(zhì)研究

該酶能夠特異性降解膠原蛋白，適用于細胞外基質(zhì)的降解與分析，幫助研究其組成和功能。

6. 其他應用

消化腸系膜脂肪組織：作為磷酸鹽緩沖生理鹽水的補充劑，用于消化已切除的腸系膜脂肪組織。

消化睪丸組織：用于消化去被膜的睪丸，制備相關(guān)細胞。

子宮內(nèi)膜組織消化：用于消化子宮內(nèi)膜組織，研究其細胞功能。

Worthington是一家創(chuàng)始于1947年，位于美國新澤西州的生產(chǎn)高純度酶類及相關(guān)生化藥劑的世界頂尖公司。Worthington通過ISO9001認證，致力于為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)。供應的生物藥劑主要純化于牛胰腺、植物、發(fā)酵產(chǎn)物及其他自然資源，Worthington專長的蛋白提取與純化技術(shù)保證了其所提供酶類擁有與其提取來源物中同等的生物活性，從而保證了研究結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。目前Worthington提供的產(chǎn)品覆蓋細胞分離消化酶、DNA酶、RNA酶等幾乎所有生命科學研究領(lǐng)域。其產(chǎn)品適用于單細胞測序，流式細胞分選，細胞治療等領(lǐng)域的細胞分離、疫苗生產(chǎn)和生物制品加工。

Worthington的Collagenase, Type 4憑借其高效、溫和的特性，成為細胞分離和組織解離領(lǐng)域的理想選擇，廣泛應用于生命科學研究的多個方向。