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abbexa abx513030說明書

更新時間:2020-06-30      點擊次數(shù):1327

abbexa abx513030說明書

1,25-Dihydroxyvitamin D3 (Calcitriol) ELISA Kit

Catalogue No: abx513030

Price: £395.00 

Available Options

* Size: 96 tests 

Calcitriol ELISA Kit is an ELISA kit against Calcitriol

骨化三醇ELISA試劑盒是針對骨化三醇的ELISA試劑盒。 
 

目標(biāo)1,25-二羥基維生素D3(骨化三醇)
反應(yīng)性一般(所有物種)
經(jīng)過測試的應(yīng)用ELISA法
建議稀釋稀釋/濃度應(yīng)由終用戶確定。
存儲出廠時溫度為4°C。收到后,請按照試劑盒手冊中的存放說明存放試劑盒。
有效期該套件的有效期為6個月。
穩(wěn)定性試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率。在適當(dāng)?shù)拇鎯l件下,有效期內(nèi)的丟失率小于5%。為了大程度地降低性能波動,應(yīng)嚴(yán)格控制操作程序和實驗室條件。還強烈建議整個測試始終由同一用戶執(zhí)行。
測試范圍15.6 pg / ml-1000 pg / ml
靈敏度<3.6皮克/毫升
標(biāo)準(zhǔn)格式凍干
ELISA檢測比色法
ELISA數(shù)據(jù)定量的
樣品類型血清,血漿和其他生物液體。
測定原理該試劑盒基于三明治酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。將抗體預(yù)包被到96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品,測試樣品和生物素偶聯(lián)試劑添加到孔中并孵育。然后加入結(jié)合了HRP的試劑,并孵育整個平板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后,只有含有足夠量的骨化三醇的孔才會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止溶液后變?yōu)辄S色。黃色的強度與結(jié)合在板上的骨化三醇的量成比例。在酶標(biāo)儀中于450 nm處用分光光度法測量光密度(OD),由此可計算出骨化三醇的濃度。
套件組件
  • 預(yù)涂96孔微孔板
  • 標(biāo)準(zhǔn)
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液
  • 洗滌緩沖液
  • 檢測試劑A
  • 檢測試劑B
  • 稀釋劑A
  • 稀釋劑B
  • TMB基板
  • 停止解決方案
  • 封口機
必需但未提供的材料
  • 37°C恒溫箱
  • 多通道和單通道移液器以及無菌移液器吸頭
  • 噴瓶或自動微孔板清洗機
  • 1.5毫升管
  • 蒸餾水
  • 吸收性濾紙
  • 100毫升和1升刻度量筒
  • 酶標(biāo)儀(波長:450 nm)
  • ELISA搖床
試劑準(zhǔn)備
  • 1)標(biāo)準(zhǔn)液:用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制標(biāo)準(zhǔn)液,制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后,按照協(xié)議中的說明,使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑緩沖液對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行系列稀釋。
  • 2)洗滌緩沖液:按照協(xié)議中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。
  • 3)檢測試劑制備:計算所需工作溶液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別以1:100稀釋檢測試劑A和檢測試劑B。
測定步驟
  • 1)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品,測試樣品和對照孔。
  • 2)將100μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液分裝到標(biāo)準(zhǔn)孔中。
  • 3)將100μl標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液等分到對照(零)孔中。
  • 4)將100μl稀釋樣品等分到樣品孔中。在37°C下孵育1小時。
  • 5)將100μl檢測試劑A分裝到每個孔中。在37°C下孵育1小時。
  • 6)洗3次。
  • 7)將100μl檢測試劑B分裝到每個孔中。在37°C下孵育30分鐘。
  • 8)洗5次。
  • 9)將90μlTMB底物等分到每個孔中。在37°C下孵育10-20分鐘。
  • 10)分裝50μl終止溶液。
  • 11)在450 nm下測量OD。
協(xié)議
  • 使用前,將試劑盒的組分和樣品平衡至室溫(18-25°C)。建議為每個測試?yán)L制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  • 1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔,測試樣品孔和對照孔(零孔),然后記錄其位置。建議測量每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品至少一式兩份。
  • 2.將100 µL的每種標(biāo)準(zhǔn)品,對照品和樣品加入適當(dāng)?shù)目字小S蒙w密封板并在37°C下孵育1小時。
  • 3.取下蓋子并丟棄液體。
  • 4.向每個孔中添加100μl檢測試劑A工作溶液。用蓋密封板并在37°C下孵育1小時。
  • 5.取下蓋子并丟棄溶液。用1X Wash Buffer清洗板3次。
  • 6.將100 µL檢測試劑B工作溶液添加到每個孔中,密封并在37°C孵育30分鐘。
  • 7.棄去溶液并按照上一步中的說明用洗滌緩沖液將板洗滌5次。
  • 8.將90μlTMB底物等分到每個孔中。用蓋密封板并在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光線下。孵育時間僅供參考,時間應(yīng)由終用戶確定。請勿超過30分鐘。
  • 9.向每個孔中加入50 µL終止溶液。立即在450 nm處讀取。
結(jié)果計算為了進(jìn)行計算,請對每個參考標(biāo)準(zhǔn)品和每個樣品的OD450重復(fù)讀數(shù)取平均值,然后減去平均對照(零)OD450讀數(shù)。可以將標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制為每種參考標(biāo)準(zhǔn)溶液(Y)的相對OD450與每種標(biāo)準(zhǔn)溶液(X)的各自濃度的關(guān)系。樣品的骨化三醇濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插。
可用性在5-12個工作日內(nèi)發(fā)貨。
注意本產(chǎn)品僅供研究使用。

 

范圍和靈敏度可能會發(fā)生變化。請與我們聯(lián)系以獲取的產(chǎn)品信息。為了獲得準(zhǔn)確的結(jié)果,必須將樣品濃度稀釋到試劑盒的中間范圍。
請注意,我們的ELISA和CLIA試劑盒針對檢測天然樣品(而非重組蛋白)進(jìn)行了優(yōu)化。我們無法保證檢測到重組蛋白,因為它們與天然蛋白可能具有不同的序列或三級結(jié)構(gòu)。

 

 

 

 

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