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qa-bio LT-MONO-96說明書

更新時間:2018-12-20      點擊次數:2954

 

QA-Bio是一家致力于提供糖基化研究工具的公司,所提供的糖基化研究產品涵蓋糖苷內/外切酶,去糖基化沒,唾液酸產品,多糖產品純化試劑盒,多糖標記試劑盒等,同時提供多糖分析服務。

 

qa-bio LT-MONO-96說明書

產品編號:LT-MONO-96

 

單糖分析試劑盒

LudgerTag單糖分析試劑盒包含用于蛋白生物制藥和標準品上發現的單糖釋放和熒光標記的試劑。

單糖分析是ICH Q6B生物制藥表征指南中規定的法規要求。該信息可用于藥物開發的所有階段,作為確定糖基化類型(N-連接和/或O-連接)和糖基化發生程度的方法。它還可用于證明制造過程中QC批次釋放的批次之間的一致性。

一個LudgerTag單糖分析試劑盒包含試劑,每套試劑可釋放和標記多達96個獨立的分析樣品,兩套試劑(每組48個樣品)。通常,每個樣品分析50微克糖蛋白。

單糖分析的方法如下:
1。通過弱酸水解從糖蛋白中釋放單糖。
2.用2-氨基苯甲酸(2AA)熒光標記釋放的單糖。
3.通過HPLC或UHPLC對2AA標記的單糖進行相對定量分析

該試劑盒還含有LudgerTag MonoMix,一種含有葡萄糖胺,半乳糖胺,半乳糖,甘露糖和巖藻糖的單糖標準品。木糖包含在內部用作內標。

提供兩種水解酸。2摩爾三氟yi酸(2M TFA)和6摩爾濃度的鹽酸(6M HCl)。2M TFA適用于釋放中性單糖,但對于我們推薦使用6M HCl的N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)單糖效果較差。我們建議在樣品的單獨重復中使用這些酸。

LudgerTag釋放試劑
三氟yi酸 - 2M TFA 
鹽酸 - 6M HCl

LudgerTag單糖分析定量標準
MonoMix單糖標準品 - 葡萄糖胺,半乳糖胺,半乳糖,甘露糖和巖藻糖各10 nmol,br> 
木糖標準品 - 100 nmol - 用作準確定量的內部參考標準

我們還推薦純化的糖肽標準品。Ludger開發了一種定量標準品(BQ-GPEP-A2G2S2-10U)是一種復雜的雙觸角N-連接聚糖,終止于兩種N-乙酰神經氨酸。使用此標準將使您能夠檢查聚糖釋放,標記和恢復的效率,并使您對單糖測量的準確性有信心。

HPLC - 標記單糖的定量分析
我們提供兩種色譜柱用于分析標記單糖,具體取決于您是否在實驗室中使用HPLC或UHPLC系統。如果使用HPLC,LudgerSep R2色譜柱(目錄號LS-R2-4.6×150)可以很好地分離大多數N-連接和O-連接聚糖中發現的七種主要單糖。如果您有UHPLC系統,我們建議使用LudgerSep uR2色譜柱(目錄號LS-UR2-2.1×50),每個樣品可分離8分鐘。

溶劑:本指南中的聚糖分析梯度基于以下溶劑:
溶劑A:BPT溶劑 - 純度水基溶劑,0.2%丁胺(每升2 mL),0.5%磷酸,每升5 mL),1%4氫呋喃(每升10毫升)。
溶劑B:50%乙腈:50%溶劑A.

我們還測試了不含乙腈的溶劑系統。請咨詢更多詳情。

單糖分析參考文獻

Abo M,He LP,Sato K,Okubo A. 用毛細管電泳法測定用2-氨基苯甲酸衍生的單糖。 方法Mol Biol。984:45-50(2013)

Harazono A1,Kobayashi T,Kawasaki N,Itoh S,Tada M,Hashii N,Ishii A,Arato T,Yanagihara S,Yagi Y,Koga A,Tsuda Y,Kimura M,Sakita M,Kitamura S,Yamaguchi H,Mimura H ,Murata Y,Hamazume Y,Sato T,Natsuka S,Kakehi K,Kinoshita M,Watanabe S,Yamaguchi T. 作為生物制藥的碳水化合物測試的單糖組成分析的比較研究。Biologicals May; 39(3):171-80。(2011年)

He L,Sato K,Abo M,Okubo A,Yamazaki S. 通過毛細管電泳分離用2-氨基苯甲酸衍生的糖類及其通過核磁共振的結構考慮。 Anal Biochem。3月1日; 314(1):128-34(2003)

Saddic GN,Dhume ST,Anumula KR。使用高熒光鄰氨基苯jia酸(AA)標簽通過HPLC進行糖蛋白的碳水化合物組成分析。方法Mol Biol。446:215-29(2008)

Sato K,Sato K,Okubo A,Yamazaki S. 通過毛細管電泳測定用2-氨基苯甲酸衍生的單糖。 Anal Biochem。8月15日; 251(1):119-21(1997)

 

貨號

名稱

規格

E-PNG01

PNGase F

60 µL

E-EF01

Endo F1

60 µL

E-S001

Sialidase Au

60 µL

E-BG07

Beta Galactosidase

60 µL

KE-DG01

Enzymatic CarboRelease Kit

1 Kit

LL-ORELA-A2

Orela O-Linked Glycan Release Kit

1 Kit

LT-KDMB-A1

DMB Sialic Acid Labeling Kit

1 Kit

KE-SIALIQ

Sialic Acid Quantitation Kit

1 Kit

LT-MONO-96

Monosaccharide Analysis Kit

1 Kit

LT-VTAG-24

V-Tag Glycopeptide Labeling Kit

1 Kit

KE-EFX3

Endo F Multi-Kit

1 Kit

E-AG02

Alpha Galactosidase

60 µL

LL-MR-A2

Ludger Liberate Membrane Release kit

1 Kit

E-S001

Sialidase Au

60 µL

E-AM02

Core Alpha Mannosidase

60 µL

 

 

 

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